|
چکیده
|
ویروئیدها در دو خانواده آوسان ویروئیده با سه جنس (Pelamoviroid ،Avsunviroid و Elaviroid) و پوسپی ویروئیده با پنج جنس (Pospiviroid, Apscaviroid, Hostuviroid, Cocaviroid, Coleviroid) طبقه بندی می شوند که ویروئیدهای شناخته شده انگور متعلق به سه جنس خانواده پوسپی ویروئیده هستند. به منظور بررسی وضعیت آلودگی به ویروئیدهای انگور از تاکستان های استان زنجان نمونه برداری به صورت انتخابی از گیاهان دارای علائم مشکوک و همچنین فاقد علائم ظاهری مشخص بیماریهای ویروئیدی انجام و در مجموع 121 نمونه گیاهی جمع آوری شد. استخراج آران ای کل از بافت های برگی و آوندی صورت گرفت و سپس، ساخت دی ان ای مکمل (cDNA) با استفاده از آغازگر تصادفی شش تایی انجام شد. آزمون نسخه برداری معکوس- واکنش زنجیره ای پلیمراز (پی سی آر) با استفاده از آغازگر اختصاصی ویروئیدهای برای ردیابی ویروئیدهای Grapevine yellow speckle viroid 1 (GYSVd-1), Grapevine yellow speckle viroid 2 (GYSVd-2), Hop stunt viroid (HSVd) و Australian grapevine viroid (AGVd) انجام شد. نتایج حاکی از تکثیر قطعات اختصاصی مربوط به ویروئیدهای ذکر شده به ترتیب در 16 ،19 ،24 و 26 نمونه (حدود 14% ،16% ،20% و 22 % نسبت به کل نمونه های آزموده شده) بود. تعیین ترادف نوکلئوتیدی هفت محصول پی سی آر به صورت انتخابی وبررسی روابط تبارزایی بر اساس توالی های نوکلئوتیدی نشان داد که جدایه های جدید ردیابی شده در این تحقیق با جدایه هایی که قبلا از ایران گزارش شده اند در یک گروه تبارزایی قرار می گیرند. عالوه براین، آلودگی مخلوط ویروئیدهای مذکور نشان داد بیشترین آلودگی مخلوط مربوط به آلودگی با ویروئید کوتولگی رازک با سایر ویروئیدها در اکثر مناطق نمونه برداری شده بود. این مطالعه اولین گزارش از شناسایی ویروئیدهای مهم آلوده کننده تاکستان های استان زنجان بر اساس داده های مولکولی می باشد.
|