چکیده
|
طبق دهمین گزارش ICTV، ویروئیدها در دو خانواده اوسان ویروئیده با سه جنسPelamoviroid) ، Avsunviroidو (Elaviroid و پوسپی ویروئیده با پنج جنس (Pospiviroid, Coleviroid, Cocaviroid, Hostuviroid, Apscaviroid) طبقه بندی می شوند که ویروئیدهای انگور همگی عضو خانواده پوسپی و یروئیده هستند. هدف این مطالعه، ردیابی ویروئیدهای تاکستان های استان زنجان بود و برای این منظور نمونه برداری در سال زراعی 96-95 به صورت انتخابی از گیاهان دارای علائم مشکوک و همچنین فاقد علائم ظاهری مشخص انجام شد. استخراج آران ای کل از بافت های برگی جمع آوری شده انجام گرفت سپس، ساخت دی ان ای مکمل (cDNA)، با استفاده از کیتCompany HyperScriptTM RT master mix; Gene All انجام شد. آزمون واکنش زنجیره ای پلیمراز (پی سی آر) با استفاده از دو جفت آغازگر اختصاصی GYSVd-1-mF (آغازگر رفت) و GYSVd-l-mR2 ، GYSVd-1-mRl (آغازگرهای برگشت) برای ردیابی ویروئید لکه زردی مو یک (GYSVd-1)، GYSVd-2-Pl (آغازگر رفت) و GYSVd-2-P2 (آغازگر برگشت) برای ردیابی ویروئید لکه زردی مو دو (GYSVd-2)، HSVd-78P (آغازگر رفت) و HSVd-83 M (آغازگر برگشت) برای ردیابی ویروئید کوتولگی رازک (HSVd) انجام شد. نتایج RT-PCR نشان داد که قطعه bp368 مربوط به (GYSVd-1) در 11 نمونه (معادل 10% نمونه های مورد مطالعه)، قطعه bp370 مربوط به (GYSVd-2) در 2 نمونه (معادل 8/1% نمونه های مورد مطالعه) و قطعه bp308 مربوط به (HSVd) در 15 نمونه (معادل 6/13% نمونه های مورد مطالعه) تکثیر یافت. نمونه های آلوده گیاهی مذکور از تاکستان های آلوده استان زنجان (ابهر، زنجان و طارم) جمع آوری شده بودند. تعیین ترادف نوکلئوتیدی برخی از محصولات به صورت انتخابی با توجه به منطقه جمع آوری شده و علائم حاکی از تعلق آنها به ویروئیدهای ذکر شده بود. براساس اطلاعات موجود، این اولین گزارش از ردیابی ویروئیدهای مذکور در استان زنجان می باشند.
|