مشخصات پژوهش

عنوان	تاثیر نوع میزبان گیاهی و نوع سیگنال پپتید بر انباشت پروتئین ضد ویروس گریفیتسین
نوع پژوهش	مقاله چاپ‌شده در مجلات علمی
کلیدواژه‌ها	آگراینفیلتراسیون، زراعت مولکولی، گریفیتسین، لکتین، HIV
چکیده	تولید ترکیباتی دارویی که در درمان بیماری هایی مانند ایدز نقش دارند، اهمیت زیادی دارد. در این بین، اثر گریفیتسین (GRFT) به عنوان یک لکتین در ممانعت از ورود HIV به سلول در غلظت های پیکومولار تایید شده است. در این تحقیق، در اولین گام با استفاده از ناقل بیانیpET28-a(+)، پروتئین گریفیتسین در باکتری اشریشیا کولی سویه BL21 بیان و خالص سازی شد. سه گیاه یونجه، سویا و کاهو به عنوان میزبان های گیاهی جهت بیان موقت انتخاب شدند. اثر سه پپتید راهنمای KDEL، Extensin و زیرواحد SP پپتید راهنمای ZERA در انباشت GRFT به ترتیب در شبکه آندوپلاسمی، فضای آپوپلاستی و فضای نزدیک به دیواره سلول های گیاهی بررسی شد. 72 ساعت بعد از آگرواینفیلتراسیون، نتایج Real Time PCR نشان داد که کاهو بیشترین و یونجه کمترین میزان رونوشت برداری از ژن GRFT را داشتند با توجه به اینکه همیشه بیان بالای یک ژن نشان دهنده تولید پروتئین بیشتر نیست، آزمون الیزا صورت گرفت. نتایج آزمون الیزا با استفاده از آنتی بادی پلی کلنال تولید شده از GRFT بیان شده در باکتری نشان داد که با هدف گذاری پروتئین در فضای آپوپلاستی گیاه سویا بیشترین تجمع پروتئین به دست آمد و سویا می تواند یک میزبان مناسب جهت بیان موقت پروتئین های دارویی باشد. در حالی که کاهو علیرغم بیان بالای ژن GRFT، انباشت پروتئین نوترکیب کمتری نشان داد که می تواند ناشی از تغییرات پس از رونویسی ژن یا تغییرات پس از ترجمه پروتئین باشد. به عنوان یک نتیجه گیری کلی با انتخاب میزبان گیاهی و پپتید راهنمای مناسب می توان می توان میزان تولید پروتئین نوترکیب را بهینه نمود. در مرحله بعد بیان ثابت پروتئین گریفیتسین را در گیاه تنباکو مورد بررسی قرار خواهیم داد.
پژوهشگران	مصباح بابالار (نفر دوم)، محمد افشار شاندیز (نفر سوم)، هوشنگ علیزاده (نفر چهارم)، یاور وفائی (نفر اول)