عنوان
|
ساخت یک موتان حساس به حرارت در مخمر S. pombe به منظور استفاده از آن در یک غربالگری ژنتیکی
|
نوع پژوهش
|
مقاله ارائه شده کنفرانسی
|
کلیدواژهها
|
غربالگری ژنتیکی، مخمر، میتوکندری، Msp1p
|
چکیده
|
ساختار میتوکندریهای سلولی به دو مکانیسم متقابل شکافتن و بهم ملحق شدن غشاء های میتوکندریایی وابسته است. فیوژن غشاء ها به عملکرد پروتئینهای متعلق به خانواده دینامین یعنی OPA1 در پستانداران و Msp1p در مخمر وابسته است. جهش های مربوط به ژن OPA1 در انسان عامل ایجاد بیماری آتروفی اپتیک اتوزومال غالب است که با از دست دادن تدریجی سلولهای گانگلیونی شبکیه ظاهر و در نهایت منجر به نابینایی می شود. درک عملکرد پروتئین Msp1p نیازمند شناسایی پروتئین های همکار است. در این مطالعه برای انجام یک غربالگری ژنتیکی به منظور جستجوی ژن های رمزگذار این پروتئین ها یک موتان حساس به حرارت در مخمر S. pombe با موتاسیون نقطه ای در توالی ژن msp1+ ساخته شد. جهش P300S با کمک نوترکیبی هومولوگ در جایگاه ژن msp1+ وارد شد. مشاهده ی ساختار میتوکندری های این سلولها با کمک میکروسکوپ فلوروسنس نشان داد که این موتاسیون عملکرد پروتئین در مکانیسم فیوژن غشاء میتوکندری را تحت تاثیر قرار داده است. عدم توانایی موتان Msp1P300S در شرایط محیط کشت غیر تخمیری حاوی قند گالاکتوز می تواند برای انجام غربالگری ژنتیکی مورد استفاده قرار گیرد.
|
پژوهشگران
|
آرزو محمدیان (نفر دوم)، فرنوش خسروبخش (نفر اول)
|