مشخصات پژوهش

عنوان	بیان ژن پوشش پروتئینی ویروس برگ بادبزنی مو در باکتری Escherichia coli
نوع پژوهش	مقاله ارائه شده کنفرانسی
کلیدواژه‌ها	ویروس برگ بادبزنی مو، پلاسمید نوترکیب، ترانسفورم
چکیده	ویروس برگ بادبزنی مو (Grapevine fanleaf nepovirus, GFLV) از جنس نپوویروس ها و خانواده کوموویریده است. ویروس GFL یکی از مخربترین بیماریهای مو در جهان است و عامل آن باعث زوال پیشرونده مو در سراسر جهان می-شود. ژن کامل پوشش پروتئینی GFLV از ایزوله ایرانی با آغازگرهای اختصاصی جدا شد و در وکتور کلون pTZ57R/Tقرار داده شد. این ژن با آنزیم های برشی Sac1 و BamH1 از وکتور کلون pTZ57R/Tجداسازی و در وکتور بیان pET-21a (+) قرار داده شد. پلاسمید نوترکیب pET-21a (+) به میزبان باکتریایی E. coli سویه Bl 21a ترانسفورم شد و باکتری های ترانسفورم شده بر روی محیط کشت ال.بی حاوی آمپی سیلین غربال شدند. تعیین توالی نوکلئوتیدی ژن GFLVcp همسانه سازی شده با روش اتومات و با استفاده از آغازگرهای عمومی وکتور pET انجام شد. باکتری های ترانسفورم شده با پلاسمید نوترکیب pET-21a (+) با 1mM از IPTG القاء شدند و بیان ژن پروتئین پوششی GFLV با روش های الکتروفورز در ژل پلی اکریل آمید حاوی سدیم دودسیل سولفات (PAGE) و الایزا، مورد بررسی قرار گرفت. نتایج هر دو روش حاکی از بیان ژن مورد نظر در سیستم باکتریایی بود.
پژوهشگران	محمد حاجی زاده (نفر اول)، علیرضا پاشایی (نفر سوم)، نعمت سخندان بشیر (نفر دوم)