مشخصات پژوهش

عنوان	بهینه سازی Western Blot و DIBA به منظور تایید بیان ژن پروتئین پوششی ویروس برگ بادبزنی مو در E. coli
نوع پژوهش	مقاله ارائه شده کنفرانسی
کلیدواژه‌ها	پروتئین، پلی اکریل امید، دیبا، وسترن بلات
چکیده	اساس روش های ایمینوبلاتینگ از جمله Western blot و DIBA انتقال پروتئین به یک غشای جاذب و ردیابی پروتئین مورد نظر با استفاده از آنتی بادی اختصاصی و مورد نیاز می باشد. در تحقیق حاضر، به منظور تایید ژن پوشش پروتئینی ویروس برگ بادبزنی مو، پس از استخراج پروتئین بیان شده از باکتری، آزمون دیبا انجام شد. در این آزمون لکه گذاری استفاده از پروتئین استخراج شده باکتری روی کاغذ نیترسلولزی و آشکارسازی آن با استفاده از آنتی بادی اختصاصی حاکی از وجود پروتئین پوششی GFLV در پروتئین اسخراج شده از سوسپانسیون باکتری بود. روش دیبا در واقع یک روش اولیه برای وجود پروتئین و بهینه سازی رقت های مناسب آنتی بادر در ردیابی پروتئین می باشد. همچنین پس از الکتروفورز در ژل اکریل آمید حاوی سدیم دودسیل سولفات، باندهای پروتئین به غشای نیتروسلولزی منتقل شدند و با اسفاده از آنتی بادی مخصوص پروتئین پوششی GFLV و کانجوگیت اختصاصی با رقت های مناسب، آشکارسازی باند مورد نظر در غشای نیتروسلولزی انجام گرفت. منطبق بودن نتایج حاصل از الکتروفورز در ژل پلی اکریل آمید، دیبا و نهایتا وسترن بلات نشان از وجود پروتئین مورد نظر در پروتئین استخراج شده از سوسپانسیون باکتری بود.
پژوهشگران	علیرضا پاشایی (نفر چهارم)، محمد حاجی زاده (نفر سوم)، نعمت سخندان بشیر (نفر دوم)، داوود کولیوند (نفر اول)