عنوان
|
بررسی تاثیر اینترون 1 فاکتور 9 انعقادی در موقعیت 5́-UTR در بیان فاکتور 9 مجهز به سیگنال پپتید لوسیفراز در سلول های پستانداران
|
نوع پژوهش
|
پایان نامه
|
کلیدواژهها
|
اینترون، فاکتور 9 انعقادی، پپتید لوسیفراز، بیان پروتئین
|
چکیده
|
درپژوهش حاضر که هدف افزایش بیان فاکتور9خونی می باشد،از توالی افزاینده بیانی که از اینترون فاکتور 9 بدست آمده است،برای افزایش بیان استفاده شده است. در این تحقیق دو سازه ژنی ساخته شدکه یکی از آنها فقط از اینترون کوتاه شده فاکتور 9 برای افزایش بیان و در دیگری اثرافزاینده اینترون در کنار سیگنال پپتید لوسیفرازکه از قبل با سیگنال پپتید فاکتور9 جایگزین شده بود،استفاده شد.پس از ساخت سازه هاوتعیین توالی آنها در دو رده سلولی به نام های CHO و HEK-293 برده شدو بیان آنها به صورت کمی و کیفی با تکنیک های الایزا،تست انعقادی و RT-PCR بررسی شدونتایج بدست آمده حاکی از اثر افزاینده اینترون بر بیان فاکتور 9 خونی است.از آنجائیکه تولید فاکتور 9،در مقیاس بالا کمک های شایانی به بیماران هموفیلی B خواهد کرد،امید آن می رود که در آینده ای نزدیک بتوان از این دو سازه در فرمانتور ،به منظور تولید این فاکتور گران بها در مقیاس تجاری و بالا استفاده کرد.
|
پژوهشگران
|
علیرضا زمردی پور (استاد راهنما)، شمس الدین احمدی (استاد راهنما)، مائده موسوی عنبریان (دانشجو)
|