مشخصات پژوهش

عنوان	بررسی امکان تهیه نانوذرات سلنید نقره با استفاده از فناوری سبز مبتنی بر سلول های میکروبی
نوع پژوهش	پایان نامه
کلیدواژه‌ها	نانوذرات سلنید نقره، سنتز برون سلولی، جنس قارچی Cladosporium sp.، عصاره ی عاری از سلول، فعالیت ضد میکروبی، طیف سنجی
چکیده	نانوذرات سلنید نقره با روش های فیزیکوشیمیایی مختلفی از جمله کاهش شیمیایی، الکتروشیمیایی، رسوب گذاری شیمیایی، تبخیر حرارتی و واکنش هیدروترمال تولید می شوند. با این حال، تولید فیزیکوشیمیایی نانوذرات مذکور علاوه بر صرف هزینه های بالا و پیچیدگی مراحل تولید، آلودگی زیست محیطی ناشی از مواد شیمیایی سمی به کار گرفته شده و تولید فرآورده های جانبی سمی و خطرناک را به دنبال دارد. از این رو، توسعه روش های مبتنی بر شیمی سبز به عنوان یک جایگزین کارآمد و قابل اعتماد بسیار اهمیت دارد. در این تحقیق سعی شده است که از پتانسیل سویه های قارچی و باکتری بومی در راستای سنتز زیستی نانوذرات سلنید نقره استفاده شود. ﻧﻤﻮﻧﻪ ﮔﻴﺮی از آب های سطحی جمع آوری شده از از سارال دیوان دره، استان کردستان، غرب ایران انجام و نمونه های آب در ظروف استریل جمع آوری و به آزمایشگاه منتقل گردید. با هدف دستیابی به جدایه های قارچی و باکتری با قابلیت تحمل پذیری بالا نسبت به اکسی آنیون سلنیت سدیم و نمک نیترات نقره، الگوی تحمل پذیری جدایه های قارچی و باکتری جدا شده از طریق روش رقت در آگار تعیین شد. ارزیابی اولیه سنتز نانوذرات سلنید نقره سنتز شده توسط عصاره ی عاری از سلول جدایه های میکروبی منتخب توسط مشاهدات چشمی و طیف سنجی نور مرئی-فرابنفش انجام شد. تایید سنتز نانوذرات سلنید نقره سنتز شده توسط عصاره ی عاری از سلول جدایه های قارچی منتخب توسط مشاهدات میکروسکوپ الکترونی ، آنالیز DLS، آنالیزهای EDX و XRD انجام شد. شناسایی ساختارک جدایه ی قارچی منتخب بر مبنای مشخصات کلنی و مشخصات میکروسکوپی انجام شد. با هدف تعیین هویت دقیق جدایه ی قارچی منتخب، نواحی ITS1-5.8S-ITS2 از طریق آغازگرهای همگانی ITS1 و ITS4 با روش PCR تکثیر گردید. ارزیابی فعالیت ضدباکتریایی نانوذرات سلنید نقره سنتز شده توسط عصاره ی عاری از سلول جدایه ی قارچی منتخب بر روی بیمارگرهای انسانی به روش دیسک دیفیوژن آگار انجام شد. براساس نتایج بدست آمده از آزمایشات الگوی مقاومت به اکسی آنیون سلنیت سدیم و محلول نیترات نقره، مشاهدات چشمی و طیف سنجی نور مرئی-فرابنفش، جدایه ی قارچی ssf15 به عنوان جدایه ی برتر در سنتز نانوذرات سلنید نقره انتخاب شد. نتایج تعیین هویت ساختارک و ملکولی جدایه ی قارچی نشان داد که جدایه ی مذکور متعلق به جنس قارچی Cladosporium با شماره دسترسی OP242915 در بانک ژنی است. بررسی ساختار سطحی نانوذرات تولیدی توسط میکروسکوپ الکترونی FESEM، سنتز نانوذرات سلنید نقره کروی شکل با اندازه میانگین قطر نانوذرات 84/37 نانومتر تحت عصاره ی عاری از سلولsp. strain ssf15 Cladosporium را نشان داد. براساس نتایج بدست آمده از آنالیز DLS میانگین اندازه نانوذرات سنتز شده توسط سویه ی قارچی مذکور 92/40 نانومتر و شاخص پراکندگی (PDI) 26/0تعیین شد. در مجموع و براساس نتایج بدست آمده در حضور غلظت های 2 میلی مولار نیترات نقره و 1 میلی مولار سلنیت سدیم، نانوذرات سلنید نقره با اشکال کروی منظم و توزیع پراکنش مناسب ایجاد شدند. با هدف بهبود راندمان زیستی نانوذرات سلنید نقره تحت عصاره ی عاری از سلول جدایه ی قارچی ssf15 در مخلوط واکنش حاوی 2 میلی مولار نیترات نقره و 1 میلی مولار سلنیت سدیم)، اثر دوره ی گرماگذاری (24، 48، 72، 96 و 120 ساعت) مورد ارزیابی قرار گرفت. براساس نتایج بدست آمده، سنتز نانوذرات سلنید نقره پس از 24 ساعت واکنش در حضور عصاره عاری از سلول آغاز و پس از 96 ساعت به حداکثر راندمان خود رسیده است. نتایج ارزیابی فعالیت ضدباکتری نانوذرات سلنید نقره سنتز شده در مقابل بیمارگرهای باکتری انسانی نشان داد که نانوذرات سنتزی پتانسیل مناسبی در مهار رشد باکتری های تست شده بالاخص باکتری های گرم منفی از جنس اشریشیا و سودوموناس دارند. این مطالعه نخستین گزارش از سنتز سبز نانوذرات سولفید نقره در جنس قارچی Cladosporium است. باتوجه به نوین بودن قارچ کلادوسپوریوم جهت استخراج و سنتز برون سلولی نانوذرات سلنید نقره به روش عصاره ی عاری از سلول می توان امیدوار بود که نتایج این پژوهش به عنوان یک روش زیست سازگار و به عنوان یک پژوهش نوآور برای مطالعات در زمینه سنتز سبز نانوذرات سلنید نقره توسط سویه های قارچی و باکتری مورد استفاده قرار گیرد.
پژوهشگران	مراحم آشنگرف (استاد راهنما)، عسل برشیدی (دانشجو)