مشخصات پژوهش

عنوان	کاربرد باکتریهای آبزی به عنوان بیوکاتالیست برای سنتز نانوذره ی سلنیوم
نوع پژوهش	پایان نامه
کلیدواژه‌ها	باکتری آبزی، سلنیت سدیم، طیف سنجی، نانوذره ی سلنیوم
چکیده	در دهه های گذشته، نانوذرات از مهم ترین موضوعات تحقیقاتی بوده اند. نانوذرات توسط روش های مختلف فیزیکی، شیمیائی و زیستی تولید می شوند. عدم زیست سازگاری و نیاز به دما و فشار بالا از اهمیت روش های فیزیکی و شیمیائی کاسته است. در روش های زیستی از میکروارگانیسم ها و گیاهان به منظور تولید نانوذرات استفاده می شود. اما در این بین، باکتری ها به علت رشد سریع و سهولت در دستکاریشان ترجیح داده می شوند. از این رو، در این پژوهش از باکتری های آبی به عنوان زیست کاتالیزگر برای احیای زیستی سلنیت سدیم به نانوذرات سلنیوم استفاده شد. در این راستا، 22 سویه ی باکتریائی تحمل پذیر نسبت به یون سمی سلنیت بر اساس تکنیک غنی سازی انتخابی در محیط کشت تریپتیک سوی براث/آگار حاوی 10 میلی مولار یون سلنیت، بر اساس تکنیک غنی سازی جداسازی شدند. مقاومت ذاتی این سویه ها نسبت به یون سمی سلنیت به وسیله ی روش رقت در آگار تعیین گردید. سویه ی باکتری SRB04 که بالاترین مقاومت را نسبت به یون سمی سلنیت داشت، انتخاب گردید. بر اساس نتایج به دست آمده، سوپرناتانت کشت سویه ی SRB04 قادر به احیای خارج سلولی یون های سلنیت به نانوذره ی سلنیوم بود. در ادامه تولید داخل سلولی نانوذرات سلنیوم توسط بیومس سویه ی منتخب مورد بررسی قرار گرفت. سویه ی باکتریائی SRB04 بر اساس تست های فنوتیپی و مولکولی به عنوان Bacillus amyloliquefaciens مورد شناسائی قرار گرفت (شماره ی دسترسی در بانک ژنیMK392020). در نهایت، تولید داخل سلولی و خارج سلولی نانوذرات سلنیوم تولید شده توسط این سویه تحت شرایط بهینه ی واکنش بررسی شد. نتایج نشان داد، نانوذرات در سوپرناتانت، بیومس و سطح باکتری با میانگین اندازه ی به ترتیب 25، 21 و 56 نانومتر در pH بهینه ی برابر 7 و دمای بهینه ی 30 درجه ی سانتی گراد، پس از 60 ساعت گرماگذاری در دور شیکر rpm 200 تولید شدند. نانوذرات سلنیوم تولید شده توسط سویه ی باکتریائی SRB04 در مخلوط واکنش زیست تبدیلی، به وسیله ی آنالیزهای طیف سنجی UV-visible، الکترومیکروگراف های تهیه شده توسط میکروسکوپ الکترونی روبشی، طیف سنجی پراش انرژی پرتو ایکس، بررسی دامنه ی پراکنش اندازه ی نانوذرات و همچنین طیف سنجی تبدیل فوریه مادون قرمز تعیین خصوصیت شدند. همچنین در این پژوهش، کارائی فعالیت ضد میکروبی نانوذرات سلنیوم درون سلولی و برون سلولی علیه برخی از باکتری های گرم مثبت و گرم منفی بیماری زای انسانی از طریق روش انتشار چاهک بر سطح آگار بررسی شد. نتایج نشان داد که نانوذرات زیستی تولید شده علیه همه ی باکتری های تست شده اثر مهار کنندگی رشد دارند.
پژوهشگران	مراحم آشنگرف (استاد راهنما)، سیده رویا حسینی (دانشجو)