هدف از مطالعه حاضر ارزیابی اثرات روش های مختلف انجماد بر ویژگی های فیزیولوژیکی اسپرم گاو نر بود. به این منظور 10 عدد بیضه از کشتارگاه تهیه و در کنار یخ به آزمایشگاه منتقل شد. پس از جدا کردن دم اپیدیدیم و ایجاد چند برش طولی، به مدت 15 دقیقه درون محیط تیرودلاکتات قرار گرفت. سپس محیط حاوی اسپرم با دور 700 در دقیقه به مدت 6 دقیقه سانتریفیوژ شد. با حذف مایع بالای محلول رسوب کرده، اسپرم اپیدیدیمی جدا شد. اسپرم های جدا شده به نسبت 1:15 با رقیق کننده بر پایه تریس رقیق شدند و پس از ارزیابی اولیه و قرارگیری در پایوت ها، برای سپری کردن زمان تعادل به مدت 5/2 ساعت به یخچال 5 درجه سانتی گراد منتقل شدند. در مرحله بعد نمونه ها با 4 روش مختلف (انجماد به روش معمولی، انجماد مرحله ای، انجماد طبقاتی و انجماد تلفیقی) منجمد شدند. بعد از یخ گشایی، ویژگی های اسپرم ها ارزیابی شد. آنالیز داده ها با استفاده از نرم افزار آماری SAS در قالب طرح کاملا تصادفی صورت گرفت. نتایج این آزمایش نشان داد که بیشتر ویژگی های اسپرم، در انجماد به روش های مختلف دارای تفاوت معنی داری می باشد و درصد میانگین پارامترهای مورد بررسی در انجماد تلفیقی دارای بالاترین میزان بود.