جلال رستم زاده

استفاده از تکنولوژی انجماد اسپرم برای بهبود بهره وری تولیدمثل و حفظ منابع ژنتیکی، منجر به آسیب های مختلف به سلول اسپرم می شود. هدف این مطالعه در آزمایش اول، بررسی اثر آنتی فریز پروتئین نوع یک (AFP I) و امکان کاهش غلظت گلیسرول به هنگام ترکیب با AFP I در محلول رقیق کننده انجماد و در آزمایش دوم و سوم، بررسی اثر آنتی اکسیدان های رسوراترول و کوئرستین به تنهایی و در ترکیب با AFP از نظر اثرات همکوشی آنها بر روی بهبود پارامترهای کیفی، ساختاری و عملکردی اسپرم بعد از یخگشایی بود. نمونه های اسپرم جدا شده از 50 جفت اپیدیدیم، پس از ارزیابی اولیه در هر تکرار با هم مخلوط و با تریس-اسید سیتریک-فروکتوز-لسیتین سویا رقیق شدند. در آزمایش اول، گلیسرول در دو غلظت 5 و 7 درصد و آنتی فریز پروتئین در سه غلظت صفر، 5 و 10 میکروگرم در میلی لیتر به آنها اضافه شد. در آزمایش دوم و سوم، علاوه بر گلیسرول و AFP، به ترتیب رسوراترول در دو غلظت 15 و 30 میکرومول و کوئرستین در دو غلظت 25 و 50 میکرومول به آنها اضافه گردید، در هر سه آزمایش گروه حاوی 7 درصد گلیسرول بدون AFP و آنتی اکسیدان به عنوان گروه شاهد در نظر گرفته شد. نتایج آزمایش اول نشان داد هر دو غلظت AFP همراه با غلظت کاهش یافته گلیسرول (5 درصد) در مقایسه با گروه شاهد و سایر گروه های تیماری می تواند تحرک کل و پیش رونده، پارامترهای VAP، VSL، VCL، ALH، STR، یکپارچگی غشاء پلاسمایی و غشاء آکروزومی، زنده مانی، یکپارچگی DNA و فعالیت میتوکندری اسپرم را بعد از یخگشایی بهبود دهد (05/0>p). بر اساس نتایج آزمایش دوم، 30 میکرومول رسوراترول در ترکیب با AFP و گلیسرول در مقایسه با گروه شاهد و سایر گروه های تیماری، تحرک کل و پیش رونده، VAP، یکپارچگی غشاء پلاسمایی و آکروزومی، زنده مانی، فعالیت میتوکندری و درصد اسپرم زنده با آکروزوم سالم را بهبود می دهد (05/0>p). نتایج آزمایش سوم نشان داد 25 میکرومول کوئرستین در ترکیب با AFP و گلیسرول در مقایسه با گروه شاهد و سایر گروه های تیماری باعث بهبود تحرک کل و پیش رونده، VAP، VSL، VCL، STR، زنده مانی، فعالیت میتوکندری، یکپارچگی غشاء آکروزوم، اسپرم زنده با آکروزوم سالم و آپوپتوز اولیه اسپرم می شود (05/0>p). بر اساس یافته های این مطالعه، امکان جایگزینی AFP I با گلیسرول ممکن بوده و افزودن 5 میکروگرم AFP با 5 درصد گلیسرول به تنهایی و یا در ترکیب با 30 میکرومول رسوراترول و یا 25 میکرومول کوئرستین به رقیق کننده انجماد می تواند کیفیت بعد از یخگشایی، پارامترهای ارزیابی شده اسپرم بز را بهبود دهد.