جهانشیر امینی

تحقیقات انجام شده نشان می دهد که باکتری های عامل پوسیدگی در ریشه چغندرقند به تنهایی موجب 71 درصد خسارت به ریشه های چغندرقند می شوند. از آنجا که قند و شکر استحصال شده از چغندرقند یک محصول غذایی مهم هست و وجود سم و هر گونه مواد باقی مانده شیمیایی ممکن است موجب به خطر انداختن سلامت مردم گردد؛ ضرورت جایگزینی مهار زیستی بیش از پیش احساس می گردد. نمونه برداری از گیاهان بالغ چغندرقند )Beta vulgaris( و چغندر وحشی) Beta maritima( در سالهای 97-96 از سه استان اصفهان، کرمانشاه و خوزستان به منظور جداسازی باکتری های اندوفیت صورت گرفت. قطعاتی از بافت های مختلف گیاه شامل ریشه های مویین، نوک ریشه، ریشه اصلی، طوقه، بر گ و میوه )درچغندر وحشی( تهیه و پس از ضد عفونی سطحی با هیپوکلریت سدیم در 4-3 میلی لیتر آب مقطر سترون له شد. از سوسپانسیون حاصل بر روی محیط کشتNA به صور ت چمنی کشت و کلونی های باکتریایی متفاوت از نظر رنگ، شکل و اندازه جداسازی و خالص سازی شدند. در مجموع 1006 باکتری اندوفیت از بافت های مختلف گیاهی جداسازی گردید. جدایه ها براساس خصوصیات فنوتیپی، بیوشیمیایی، محرک رشدی و کنترل زیستی شامل کاتالاز ،اکسیداز، گرم، تولید رنگدانه فلورسنت، تثبیت ازت، حل فسفات، تولید فسفاتاز، تولید لیپاز ، تولید پروتئاز و آنتی بیوز با استفاده از نرم افزارNTSYS درسطح 50% به 10 گروه تقسیم بندی شدند. تاثیر همستیزی باکتری ها ی اندوفیت منتخب از هر گروه برعلیه عوامل مولد پوسیدگی نرم چغندر قند،Bacillus pumilus و Enterobacter roggenkampii و همچنین عامل مولد پوسیدگی خشک، Pseudomonas thivervalensis در شرایط In vitro وIn situ مورد بررسی قرا ر گرفت. نتایج نشان داد جدایهBt851 برعلیه بیمارگرBacillus pumilus با 19/53% و چهار جدایهAndi542 ، B451 ،H274 وB186 در مقابل جدایه بیمارگرEntrobacter roggenkampii به ترتیب با 37 %، 14/37%، 20 %و 20 %بازدارندگی بیشترین توانایی همستیزی را در شرایطIn situ دارند. نتایج همستیزی جدایه های اندوفیت نشان داد که جدایه های S411 ،Andi542 و B451 به ترتیب با32/74، 51/%52 و 39/52 %بازدارندگی بیشترین توانایی همستیزی را برعلیه باکتری عامل پوسیدگی خشک دارند. شناسایی جدا یه های اندوفیت منتخب با تعیین توالی نوکلئوتیدی ژن 16S rRNA و مقایسه آن با توالی های موجود درNCBI انجام گردید. نتایج نشان داد ک ه جدایه ه ا یB451 ،H274 ،Bt851 ،S411 ،Andi542 و B186 به ترتیب دارای بیشترین شباهت نوکلئوتیدی با Bacillus ،Bacillus proteolyticus Bacillus pumilus و Pseudomonas brassicacearum ،Bacillus pumilus ،Pseudomonas brassicacearum ،pumilus بودند.