محمد حاجی زاده

ویروس برگ بادبزنی مو (Grapevine fanleaf nepovirus, GFLV) از جنس نپوویروس ها و خانواده کوموویریده است. ویروس GFL یکی از مخربترین بیماریهای مو در جهان است و عامل آن باعث زوال پیشرونده مو در سراسر جهان می-شود. ژن کامل پوشش پروتئینی GFLV از ایزوله ایرانی با آغازگرهای اختصاصی جدا شد و در وکتور کلون pTZ57R/Tقرار داده شد. این ژن با آنزیم های برشی Sac1 و BamH1 از وکتور کلون pTZ57R/Tجداسازی و در وکتور بیان pET-21a (+) قرار داده شد. پلاسمید نوترکیب pET-21a (+) به میزبان باکتریایی E. coli سویه Bl 21a ترانسفورم شد و باکتری های ترانسفورم شده بر روی محیط کشت ال.بی حاوی آمپی سیلین غربال شدند. تعیین توالی نوکلئوتیدی ژن GFLVcp همسانه سازی شده با روش اتومات و با استفاده از آغازگرهای عمومی وکتور pET انجام شد. باکتری های ترانسفورم شده با پلاسمید نوترکیب pET-21a (+) با 1mM از IPTG القاء شدند و بیان ژن پروتئین پوششی GFLV با روش های الکتروفورز در ژل پلی اکریل آمید حاوی سدیم دودسیل سولفات (PAGE) و الایزا، مورد بررسی قرار گرفت. نتایج هر دو روش حاکی از بیان ژن مورد نظر در سیستم باکتریایی بود.