مقدمه: تیروزیناز(EC 1.14.18.1) آنزیمی کلیدی است که سنتز ملانین را در گیاهان، میکروارگانیسم‌ها و سلول‌های پستانداران کاتالیز می‌کند. ترکیبات بازدارنده بیوسنتز ملانین نه تنها به عنوان عوامل سفید کننده پوست مورد استفاده در لوازم آرایشی، بلکه به عنوان یک درمان برای اختلالات رنگدانه نیز مفید هستند. بنابراین، بسیاری از مهارکننده‌های تیروزیناز در لوازم آرایشی و دارویی به عنوان راهی برای جلوگیری از تولید بیش از حد ملانین در لایه‌های اپیدرم آزمایش شده‌اند. مهارکننده‌های تیروزیناز عموماً دو نوع کاربرد اصلی دارند، اول در زمینه آرایشی برای سفید کردن پوست و به عنوان درمانی برای برخی مشکلات پوستی، دوم در زمینه کشاورزی برای جلوگیری از قهوه‌ای شدن آنزیمی میوه‌ها و سبزیجات. انواع مختلفی از مهارکننده‌های تیروزیناز وجود دارد که توسط محققان کشف شده‌اند، اما تاکنون تقریباً همه آنها معایب خاص خود را دارند، تا کنون محققان به جستجوی مهارکننده تیروزیناز ایمن، مؤثر و آسان در دسترس هستند. هدف: هدف از این مطالعه مقایسه پتانسیل آنتی تیروزیناز و آنتی اکسیدانی اسید گالیک و آلفا-پینن بود. روش‌ها: کار یک بار با استفاده از روش‌های اتصال مولکولی (در سیلیکو) انجام شد. سپس کار در آزمایشگاه با استفاده از قارچ تیروزیناز، پیروکاتکل به عنوان سوبسترا و استفاده از اسید کوجیک به عنوان بازدارنده استاندارد آنزیم در آزمایشگاه اعمال شد. سنجش آنزیمی و آنالیز سینتیکی زیر همگی در میکروپلیت های 96 چاهی انجام شد و با استفاده از میکروپلیت خوان در طول موج 450 نانومتر دنبال شد. همچنین، فعالیت آنتی اکسیدانی اسید گالیک و آلفا-پینن با استفاده از رادیکال های آزاد با رادیکال های 1،1-دی فنیل-2-پیکریل هیدرازیل (DPPH) مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج: نتایج داکینگ مولکولی نشان داد که اسید گالیک میل اتصال بسیار خوبی به آنزیم تیروزیناز دارد ΔG = -6.33 Kcal/mol که یک پیوند H با Met 280 و یک pi-pi انباشته با His 263 تشکیل می دهد. از طرف دیگر، آلفا-پینن تنها از طریق فعل و انفعالات آبگریز قادر به اتصال به جایگاه فعال تیروزیناز بود، به همین دلیل است که برای مقادیرعددی میل اتصال بسیار کم (ΔG = -3.89 کیلوکالری در مول) با توجه به نتایج مهار تیروزیناز، اسید گالیک بالاترین اثر بازدارندگی را با IC50 = 0.130 نشان داد. از طرف دیگر آلفا-پینن با IC50 = 0.392 میلی گرم در میلی لیتر ظرفیت بازداری کمتری را نشان داد. انواع مهار عبارت بودند از مهار رقابتی برای اسید گالیک و مهار غیر رقابتی برای آلفا-پینن. فعالیت مهار رادیکال DPPH و مقادیر EC50 برای اسید اسکوربیک به عنوان کنترل مثبت، اسید گالیک و آلفا-پینن تعیین شد. مقدار EC50 برای اسید اسکوربیک 03/0 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر بود، در حالی که این مقدار برای اسید گالیک و آلفا-پینن به ترتیب 269/0 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر و 2/251 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر بود. نتیجه‌گیری: نتایج هم از نظر پیامدهای سیلیکو و هم از نظر آزمایشگاهی تقریباً یکسان است و همچنین پیش‌بینی ما برای وجود خاصیت بازدارندگی تیروزیناز در (آلفا-پینن ، اسید گالیک) درست بود. هر دوی آنها ممکن است به عنوان مهارکننده تیروزیناز در نظر گرفته شوند اما با اشکال و شرایط متفاوت. در حالی که آلفا-پینن به عنوان اسید گالیک مهارکننده قوی نیست، شاید با افزایش غلظت آن اثر آن افزایش یابد. پتانسیل آنتی اکسیدانی اسید گالیک بسیار بالاتر از آلفا-پینن است، بنابراین از این نظر اسید گالیک نیز بی ضررتر و با ایمنی بالاتر قابل استفاده است. هر دوی آنها را می توان از منابع طبیعی تهیه کرد زیرا هم زمینه های آرایشی و هم کشاورزی نیاز به بررسی ایمنی دارند.
