زمینه و هدف: سلولهای کراتینوسایت انسانی ابزار مفیدی جهت انجام مطالعات سلول درمانی به منظور بهبود سوختگی ها و زخم های مزمن محسوب می شوند. همچنین کراتینوسایتها با کارائی بالا به سلولهای پرتوان القائی تبدیل می شوند. در این مطالعه جزئیات مربوط به روشهای جداسازی، کشت و تکثیر سلولهای کراتینوسایت از نمونه پوستی ختنه گاه انسان، توصیف شده است. روش بررسی: در این مطالعه که از نوع آزمایشگاهی، و مشاهده ای بود. نمونه مربوط به پوست ختنه گاه نوزادانی که به تازگی ختنه شده بودند تحت شرایط استریل به آزمایشگاه منتقل شد. از آنزیم دیسپاز جهت جداسازی اپیدرم از درم و از آنزیم تریپسین برای جداسازی سلولهای کراتینوسایت موجود در لایه اپیدرم استفاده شد. سلولها در ظروف کشت پوشش داده شده با کلاژن I نوع انسانی و محیط کشت اپی لایف عاری از سرم، کشت داده شدند. ارزیابی های مورفولوژیک و ایمونوسیتوشیمی جهت تایید ماهیت سلولهای جدا سازی شده انجام شده است. یافته ها: نتایج ارزیابی های انجام شده نشان داد که سلولهای جداسازی شده دارای مورفولوژی تیپیک کراتینوسیتها بوده و آنتی ژن اختصاصی کراتینوسیت ها CK14 را هم بیان می کنند. هر 4 الی 5 روز یکبار سلولها به نسبت 1 به 2 پاساژ داده شدند. بعد از پاساژ 10، تکثیر سلولها به شدت کاهش یافته و از نظر مورفولوژیک ظاهری پهن ونازک پیدا کردند. نتیجه گیری: در این مطالعه نحوه جداسازی و تکثیر کراتینوسیتهای انسانی مشتق از نمونه پوستی ختنه گاه انسان در آزمایشگاه بهینه سازی شد. از آنجائیکه بیش از بیست بار سلولها با موفقیت جداسازی شدند، می توان نتیجه گرفت که روش معرفی شده در این مقاله که نسبت به روش های پیشین همراه با مقداری تعدیل و بصورت جزیی تری توصیف شده است در آزمایشگاههای دیگر نیز تکرار پذیر است.
