محمدعلی زارعی

چکیده: بازبرنامه ریزی سلول های تمایز یافته انسان به سلول های القا شده پرتوان ) iPS ( در زیست شناسی پایه، توسعه داروها و پیوند دارای کاربرد می باشد. این کار اولین بار به واسطه بیان چهار فاکتور رونویسی c-Myc ،Sox2 ،Oct4 و Klf4 در سلول-های فیبروبلاست انجام شد. هدف: هدف از این مطالعه القای پرتوانی در سلول های کراتینوسایت پوست انسان با استفاده از پلاسمید حاوی چهار فاکتور رونویسی c-Myc ،Sox2 ،Oct4 و Klf4 بود. روش: در این تحقیق، سلول های کراتینوسایت از نمونه پوست ختنه گاه انسان جداسازی و کشت شدند. روند انتقال ژن با استفاده از پلاسمید حاوی ژن ) GFP)( pCAG-GFP ( بهینه سازی شد. برای ترانسفکشن سلول ها از لیپید کاتیونیک افکتن استفاده شد. پس از آن سلول های iPS با استفاده از وکتور پلاسمیدی pCAGMKOSiE تولید شده و از نظر بیان مارکرهای جنینی مورد بررسی قرار گرفتند. یافته ها: نتایج ترانسفکشن سلول ها با چهار فاکتور رونویسی c-Myc ،Sox2 ،Oct4 و Klf4 نشان داد سلول های کراتینوسایت در یک فرایند تدریجی و در طول 3- 2 هفته بازبرنامه ریزی می شوند، به طوری که در نهایت مارکرهای پرتوانی از جمله آنتی ژن ها و ژن های اختصاصی سلول های ES در آن ها بیان می شوند. بحث و نتیجه گیری: دودمان های iPS تولید شده با استفاده از وکتور پلاسمیدی در این تحقیق، می توانند ابزار ارزشمندی برای مطالعه بر روی سلول های iPS و مکانیسم بازبرنامه ریزی سلول باشند. این مطالعات می تواند در نهایت دانش ما را از چگونگی کنترل ژنوم و تمایز سلولی گسترش دهد و از سوی دیگر راهگشای کاربردهای بالینی ایمن سلول های iPS باشد.