مقدمه: فعالیت بسیاری از آنزیم‌ها را می‌توان به وسیله یون‌ها و مولکول‌های کوچک اختصاصی مهار نمود. این نکته به این معناست که مهار فعالیت آنزیمی به عنوان یک مکانیسم کنترلی مهم در سیستم‌های زیستی عمل می‌کند. در تحقیقات بنیادی، مهارکننده‌ها به عنوان ابزارهای مفیدی جهت تشخیص مکانیسم و چگونگی اتصال سوبسترا به آنزیم محسوب می-شوند. با بررسی تمایل اتصال مهارکننده‌ها به جایگاه فعال آنزیمی، می‌توان به ساختار سه بعدی و معماری جایگاه فعال پی-برد. مهارکننده‌های طبیعی و سنتزی، کاربردهای تجاری مختلفی نیز دارند. این مهارکننده‌ها با ممانعت از فعالیت یک آنزیم خاص، انگل‌ها و موجودات موذی را از بین می‌برند. بسیاری از داروها مهارکننده ویژه یک آنزیم هستند و به همین دلیل بررسی مهار آنزیمی، یکی از تحقیقات مهم در صنعت داروسازی می باشد. مطالعه حاضر در جهت بررسی اثر مشتقات سولفونامیدی بر ساختار و فعالیت آنزیم کربنیک انیدراز و اثر قند گلوکز بر گلایکه‌شدن و ایجاد رادیکال آزاد اکسیژن در آن می‌باشد. مواد و روش‌ها: مطالعات با خالص‌سازی آنزیم کربنیک انیدراز از اریتروسیت خون انسان آغاز شد و سنجش‌های سینتیکی روی آن انجام پذیرفت. سپس تعدادی ترکیب سولفونامیدی برای بررسی میزان مهار مورد مطالعه قرار گرفتند. در ادامه مطالعه برگشت‌پذیری اتصال لیگاندها به آنزیم انجام یافت. به منظور مطالعه ساختار دوم و سوم و تغییرات آن‌ها از تکنیک های دورنگ نمایی دورانی و فلورسانس استفاده گردید. سپس مکانیسم خاموش کنندگی، تعداد جایگاه های اتصال، ثابت اتصال، پارامترهای ترمودینامیکی و استوکیومتری اتصال دارو به آنزیم مطالعه شد. در پایان و به منظور مطالعه اثر گلوکز روی آنزیم و بررسی روند احتمالی گلایکه شدن، آنزیم با گلوکز انکوبه شد و برای مطالعات ROS آماده گردید. نتایج: نتایج برگشت پذیری نشان داد که اتصال لیگاندها به آنزیم برگشت پذیر است و مکانیسم های مهار متفاوتی دیده شد. مطالعات فلورسانس تغییرات ساختار سوم را در غیاب و حضور غلظت های مختلف لیگاندها نشان داد. مطالعات دورنگ نمایی دورانی نیز تغییرات ساختار دوم را تایید کردند که برای لیگاندهای مختلف متفاوت بود. در ادامه کار گلایکه شدن نیز انجام شد و میزان لایزین‌های مدیفای شده تعیین گردید و مطالعات محاسباتی نیز روی آنزیم انجام شد. نتیجه‌گیری: احتمال می‌رود که گلایکه شدن آنزیم تغییرات ساختاری دوم و سوم را القا کند و محصولات نهایی گلایکه شدن نیز رادیکال آزاد تولید کنند که با روش کمی لومینسانس مطالعه خواهد گردید.
