عباس فرشاد

چکیده هدف از این پژوهش ارزیابی صفات مختلف اسپرم اپیدیدیمیس قوچ در زمان های مختلف در دمای 5 درجه سانتی-گراد و همچنین پس از انجماد و انجماد دوباره در رقیق کننده پایه تریس، اسید سیتریک- فروکتوز (همراه با 5% گلیسرول و 5% زرده تخم مرغ ) و رقیق کننده حاوی ویتامین Eو BME بود. تعداد 10 جفت بیضه از کشتارگاه تهیه و پس از جدا نمودن دم اپیدیدیم و ایجاد چند برش در آن درون محیط تیرود لاکتات به مدت 15 دقیقه قرار گرفت. سپس قسمت حاوی دم اپیدیدیم از ظرف خارج و محیط حاوی اسپرم با دور 700 در دقیقه یه مدت 6 دقیقه سانتریفیوژ شد، با برداشتن مایع بالای محلول رسوب کرده، اسپرم اپیدیدیمی به دست می آید سپس اسپرم-های جدا شده در داخل رقیق کننده پایه وبه همراه ویتامین E (mM1)، BME(5%) قرار گرفت، سپس مایع منی رقیق شده را از دمای 37 درجه سانتی گراد به دمای 5 درجه سانتی گراد رسانده و در دمای 5 درجه در زمان های مختلف قرار گرفتند سپس با میکروسکوپ ویژگی های اسپرم ها را ارزیابی کردیم، در مرحله بعد به دمای 196- درجه سانتی گراد رساندیم، بعد نمونه ها را به دمای 37 درجه سانتی گراد رسانده و سپس نمونه ها را به وسیله ائوزین - نیگروزین رنگ آمیزی و با میکروسکوپ ویژگی های اسپرم را مورد ارزیابی قرار دادیم. آنالیز آماری داده ها با استفاده از نرم افزار SAS و براساس طرح فاکتوریل و در قالب طرح بلوک کاملا تصادفی انجام شد. نتایج حاصل از این مطالعه در 5 درجه سانتی گراد نشان داد که بالاترین درصد جنبایی، جنبایی پیش رونده و زنده-مانی مربوط به تیمار BME(95/0±85/89- 84/0±43/84- 65/0±61/86) و بیشترین درصد سلامت غشاء مربوط به تیمار شاهد با میانگین 46/0±78/79 بود، همچنین بالاترین درصد سلامت آکروزوم مربوط به تیمارهای BME و شاهد (82/0±75/86-42/0±37/84) بوده است(p<0.05). نتایج بعد از یخ گشایی نشان داد، میزان جنبایی اسپرم بعد از گشایی در گروه ویتامین E وBME افزایش معنی داری (92/1±70/46- 17/1±47/42) نسبت به تیمار شاهد داشتند. زنده مانی هر 3 گروه بعد از یخ گشایی تیماری اختلاف معنی داری داشتند، بیشترین درصد زنده مانی مربوط به تیمار BME 47/0±45/55 بود. سلامت غشاء تیمارهای ویتامین E و شاهد اختلاف معنی داری نسبت به BME و تیمار ترکیبی داشتند(p<0.05). نتایج این تحقیق در یخ گشایی مجدد، نشان داد که ترکیب محلول اسید آمینه ای BME و ویتامین E در